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western blot步骤
Western
Blot
为什么必须要用内参
答:
,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在
Western
Blot
实验中,除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等
步骤
以外,还需要进行内参的检测,以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性 ...
在做
western
-
blot
时,昨天的样品和今天的一样为什么昨天有条带出现而...
答:
我做
western
有时也是出现这样的情况,样品保存好,防止降解,封闭时间要合适,过长过短都会影响结果,不建议过夜封闭。一抗二抗浓度要合适。另外,考虑下你昨天的条带是不是正确的带,如果昨天的条带没有说服力,那么今天不出现条带是正常的。
western
blot
的内参不一致,急求助
答:
在
Western
Blotting
实验中,除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等
步骤
以外,还需要进行内参的检测,以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。 实际上内参是最容易被忽略的一项。我们知道,要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白...
western
blot
放大原理,放大放大。。。为何会放大。。。
答:
少年,
western
blot
最后放大的方法有很多很多,从你的叙述上来看,“在底片上有明显的显影”,就是底片显影,那我们就只说说这个哈。首先,聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白会固定到醋酸纤维膜上,然后加上该蛋白的一抗。如果蛋白表面只有一个一抗结合位点,那么就结合一个一抗,也就没什么;如果蛋白表面有多个...
wb实验目的条带就(一定比内参细吗
答:
要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是
western
Blot
。因为
Western
Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条...
免疫组化和
western
blot
有什么区别
答:
1、原理不同:免疫组化利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。
western
blot
也是利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的...
Western
Blot
前一定要做蛋白浓度测定吗
答:
主要是有个工具可以帮助你判断每个样品上多少量,不然有些样品浓度高,样品上多了,结果都糊成一堆,或者是浓度低,检测不到,还有可能高的高,低的低,高的过曝了,低的还没曝出来。试想对于样品中含有多少蛋白完全不清楚,那最后实验没结果时,应该怎么分析呢?WB
步骤
那么多,时间还长,与其做到...
Western
Blot
前一定要做蛋白浓度测定吗
答:
主要是有个工具可以帮助你判断每个样品上多少量,不然有些样品浓度高,样品上多了,结果都糊成一堆,或者是浓度低,检测不到,还有可能高的高,低的低,高的过曝了,低的还没曝出来。试想对于样品中含有多少蛋白完全不清楚,那最后实验没结果时,应该怎么分析呢?WB
步骤
那么多,时间还长,与其做到...
大肠杆菌感受态细胞的制备方法
步骤
谁能介绍下!
答:
用1ml冰冷的0.1mo1/L CaCl2溶液轻轻悬浮细胞,冰浴;详细方法登陆生物帮了解下,http://www.bio1000.com/zt/protein/214560.html
western
blot
,蛋白质印迹,western blot,w蛋白印迹,western blot原理
步骤
,western blot内参,western blot试剂仪器,western blot结果,western blot图片视频 。
WB蛋白电泳实验
步骤
,液体的配置及相关问题解答
答:
深入探讨WB蛋白电泳实验:
步骤
详解与常见问题解答
Western
Blot
,简称WB蛋白印迹法,是科研领域中不可或缺的实验手段。以下是一份详细的电泳液配置和实验步骤,以及常见问题的解答,希望对您的实验工作提供有力支持。1. 试剂配置与选择电泳液: 以100ml为基准,准备Tris 3.03g, 甘氨酸 18.8g, SDS 1g。
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